基本信息：
产品名称：β木糖苷酶微量法检测试剂盒
测试方法: 微量法
规格 : 100管/48样
货号：GOY-01S6759
分类：糖代谢系列
测定意义：
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、和等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。

测定原理

β-木糖苷酶催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚，对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰，测定405nm光吸收增加速率，可计算β-木糖苷酶活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计、微量石英比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品：液体×1支（EP管中），2 μmol/mL酚标准液，4℃保存。
测定步骤：
1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸馏水，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A空白管。
4. 标准管：取EP管，加入4μL标准品，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A标准管。
5. 对照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸馏水，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A测定管。
6. 测定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A测定管。
其中标准管和空白管只需做一管，测定管和对照管每个样均需做。
注意：空白管和标准管只需测定一次。产品仅用于科研
小鼠CD80分子(CD80/B7-1)ELISA试剂盒 ，英文名： CD80/B7-1 ELISA Kit

鲑鱼补体蛋白4(C4)ELISA检测试剂盒SalmonCompleme4,C4ELISAKit 96T/48T

犬转移生长因子β1(TGF-β1)免疫试剂盒 Dog ansforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit

英文名称MouseCCL1ELISAKit小鼠CCL1规格：96T/48T

冰冻切片组织细胞色素C氧化酶表达免疫荧光检测试剂盒10/20次

ratEsadiolreceptor,ERELISA试剂盒大鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠酶2(CA-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat activated protein C (APC) ELISA Kit 大鼠活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒

HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit 人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Cobravenomfactor,CVFELISA试剂盒毒蛇因子(CVF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞钙ATP酶SERCA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

Mouseendotoxin,ETELISAKit小鼠内毒素(ET)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit 人抗原提呈相关蛋白/T细胞活化蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

anti-SPA-1/SIPA-1 信号感应增殖相关蛋白1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-Mouse IgG/Gold 胶体金标记的羊抗小鼠IgG 规格 0.5ml

Ang- I ELISA Kit 大鼠血管紧张素Ⅰ 96T

NMDAR1 英文名称： 谷酸受体1抗体 0.1ml

BRSK2 英文名称： 脑蛋白丝酸/苏酸激酶29抗体 0.2ml

anti-SPA-1/SIPA-1 信号感应增殖相关蛋白1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
β木糖苷酶微量法检测试剂盒Anti-Trk B/FITC 荧光素标记酪氨酸激酶B抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Tanis/SELS (Selenoprotein S)又称SELS 炎症负调控因子蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

微管蛋白-γ抗体 Anti-Tubulin-γ 0.1ml

phospho-SYN1(Ser553) 英文名称： 0酸化神经突触素1抗体 0.1ml

ERG25 英文名称： 甲基固醇羟化酶单加氧酶1抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1185) 0酸化胰岛素受体β抗体 规格 0.1ml

Tanis/SELS (Selenoprotein S)又称SELS 炎症负调控因子蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
操作步骤：
1. 样品的准备：
a. 细胞样品的准备：收集细胞，用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心，取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备：动物用生理盐水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝素钠) 灌流血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心，取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒（P1511）测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大，该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量，用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如，小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定，可以-70 ℃冻存，但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 参照下表，根据待检测样品(包括标准品) 数量，配制适量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。
注意：由于酶溶液的用量较少且易沉降，必须注意在使用前先轻轻离心一下，然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制：将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀，按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释，即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备：需自备SOD标准品，用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升，参考样品进行检测。说明：为避免稀释后SOD酶活性的下降， SOD标准品宜现稀释现使用；本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品，但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
3. 样品测定：
a. 参考下表使用96孔板加入各个组分，注意设置样品孔和各种空白对照孔。
注意：加入反应启动工作液后反应即会开始，可以在低温操作或用排枪操作以减小各孔间因加入反应启动工作液的时间先后差异而导致的误差。
b. 37℃孵育30分钟。
说明：孵育25至35分钟检测出来的SOD活力无显著差异，但为检测结果的一致性，推荐孵育30分钟。
c. 450nm 测定吸光度。如无450nm 滤光片，可以使用420-480nm 的滤光片。也可以使用大于600nm 的波长作为参考波长进行双波长测定。
4. 样品中总SOD活力的计算：
a. 百分率的计算：
参考如下计算公式计算百分率：
百分率＝[(A空白对照1－A空白对照2)－(A样品－A空白对照3)] / (A空白对照1－A空白对照2) × 100%
如果没有设置空白对照3，则可以把计算公式简化为：
百分率＝(A空白对照1－A样品) / (A空白对照1－A空白对照2) × 100%
如果计算出来的百分率小于30% 或大于70% ，则通常需要把该样品重新测定。尽量使样品的百分率在30-70%范围内。如果测定出来的百分率偏高，则需适当稀释样品；如果测定出来的百分率偏低，则需重新准备浓度较高的待测样品。
b. SOD酶活力单位的定义：在上述化酶藕联反应体系中百分率为50% 时，反应体系中的SOD酶活力定义为一个酶活力单位 (unit)。注意：SOD的活力单位的定义方式有很多种，不同的活力单位需根据其定义的不同进行适当换算。