ELISA检测概述
      ELISA酶联免疫试剂盒是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。
产品名称：大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA酶联免疫试剂盒
英文名称：Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1, TRAIL R1 Elisa Kit
货号：BH-H9048
规格：48T/96T
自备物品:
1.     酶标仪（450nm）
2.     高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.     37℃恒温箱

应用范围：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体（本产品仅供实验室科研及非临床用途）
     大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA酶联免疫试剂盒实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤:
1.        标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。
2.         加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.         配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.         温育：操作同3。
8.         洗涤：操作同5。
9.         显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.     终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.     测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
IL6 Protein Mouse 重组小鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白(-)-莨菪碱,L-天仙子胺，澳洲毒茄碱(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品(-)-Hyoscyamine

Romas(人瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(人二倍体胚肺细胞)葡聚糖D70/右旋糖苷质量规格：Mw:63000~77000,USP32Dextran D70

CL-0124IMR-32(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2右旋糖苷/葡聚糖D40质量规格：Mw35 000 to 45 000Dextran D40

TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 葡聚糖D20/右旋糖苷质量规格：MW:16000~24000Dextran D20

人肠平滑肌细胞裂解物HISMCL (R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇(>99.0%(GC))质量规格：>99.0%(GC) (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol
人永生化细胞;CNLMG-B5538LC 人肝动脉平滑肌细胞完全培养基 100mLTributylphosphite亚嶙酸正丁酯100克BR，97%

人绒毛间叶成纤维细胞RNAHVMF miRNA5 μg本同;基本基同;酰本 ccqtophqnonq;Mqthyl phqnyl kqtonq;BqnzoylMqthcnq;Hypnonq;Phqnylqthcnonq;ccqtylbqnzqnq 98-86-

SERPINB6B Others Mouse 小鼠 Serpinb6b 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex LH-20 Null 25G 分离试剂

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7Span40司班401公斤BR

CW-2细胞，结肠腺癌细胞 皮肤T细胞瘤,Hut-78细胞 人成骨肉瘤细胞;MG-63GlycogenTypeIII 100mg/500mg/1g原装 Sigma G8876
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA酶联免疫试剂盒CLEC7A Others Human 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人细胞裂解液 (阳性对照) Z-Asn-OHN-苄氧羰基-L-天冬酰胺250毫克BR，98%

大鼠肝星形细胞RHSteC1-己流醇;1-;流代 1-Hqxcnqthiol;Hqxyl Mqrccptcn;n-Hqxcnqthiol;Mqrccptcn C6;priM-n-Hqxyl Mqrccptcn

NCI-H596[H596]细胞，人肺癌细胞 人肾癌细胞,SK-RC-42细胞 人肝星形细胞HHSteCTaqplus酶shēng huà shì jì容量：1公斤

小香猪皮肤细胞;SSC-S2Thiourea500克BR，99%

NCR3 Others Human 人 NKp30 人细胞裂解液 (阳性对照) 367-86-24-扶-3-硝基三扶4-Fluoro-3-nitnobenzotrifluoride
小鼠成纤维细胞(EGFP标记)木栓酮（标准品）FRIEDELIN质量规格：鉴别

人男性正常细胞;Hs68 人结肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL表木栓醇（标准品）FRIEDELAN-3BETA-OL质量规格：鉴别

人真皮成纤维细胞-裂解物HDF-a L老龙皮酸；网脊衣酸 A（标准品）(4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid质量规格：鉴别用

SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人细胞裂解液 (阳性对照) 焦性没食子酸（标准品）Pyrogallol质量规格：含量测定

人肾透明细胞腺癌细胞;786-O [786-0]正十九烷（标准品） N-NONADECANE 质量规格：内标