肺缺血再灌注损伤是由于机体组织或在缺血再灌注后导致肺组织迅速损伤。缺血再灌注可能发生在肺,也可能是下肢或腹主动脉等,导致肺泡上皮细胞和肺毛细胞血管内皮细胞受损。
究其原因可能与组织细胞聚集、氧自由基产生和促炎因子释放等病理生理反应有关。
结扎法制备肺缺血再灌注损伤模型常用,因其操作简单、成功率高、实用性强,是研究肺缺血再灌注损伤发病机制和防治保护的关键。
制备肺缺血再灌注模型我们选用适龄的SD大鼠,通过结扎手术进行造模。
原位杂交过程
杂交前可进行预杂交,以防止较高的背景染色。预杂交条件与杂交条件相同,只是预杂交液中不含探针和硫酸葡聚糖。
靶DNA的变性(对mRNA的原位杂交无需此步)
样品DNA的变性在DNA-DNA杂交检测中是必须的步骤,但同时可能会造成样品形态学的部分破坏,此步是实验中需要优化的一个步骤。常用的变性方法为碱变性和热变性,实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得佳条件。
如使用热变性方法,可在杂交时将探针的变性和样品DNA变性同步进行:将样品和探针溶液加盖盖玻片,置于烘箱80℃变性,染色体DNA样品处理2min,后冷却至37℃进行杂交。组织样品DNA的变性时间可增加至80℃10min。
动物实验检测原理:
动物模型是在生物医学研究过程中所建立的具有人类疾病性模拟性表现的动物疾病材料,这种方法是促进生物医学的发展的一种重要的途径,无论在疾病的发生和发展过程中,都起到了至关重要的作用。其中,模型是生物医学领域中为常用的动物模型之一,它包括皮下模型、模型及原位模型等。
通过建立小鼠荷瘤数据模型,研所生长本质机器发展规律,从而寻求对生长及转移有抑制作用的及方法。
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