DAPI染色液   B1061

描述：DAPI(4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸 盐，4，6-联脒-2-苯基吲哚)， CAS: 28718-90-3，分子式: C16H15N5，分子量:277.324。英文名:4,6-diamidino-2-phenylindole，2-(4-amidinophenyl)-1H -indole-6-carboxamidine，DAPI dihydrochloride。DAPI 为一种能够与 DNA 中大部分 A，T 碱基相互结合的荧光染料，可以穿透完整的细胞 膜，与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍，是非常优秀的DNA染料。荧光显微镜下可以看到细胞核呈显蓝色荧光，细胞标记的效率高(几乎为100 %) 。DAPI常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，DAPI染色也常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到细胞核的形态变化（a. 正常的细胞核: 核形完整，染色质均匀。b. 染色质固缩，向外周聚集，形成周边化。c. 染色质进一步固缩，形成很多颗粒物质。d. 细胞核破裂形成碎片，核解体。）。DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm； 当DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为360nm，最大发射波长为460nm。 DAPI的发射光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red 染剂（红色荧光染剂）的发射波长仅有少部分重叠，可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。本产品为DAPI PBS溶液，纯度≥90%，为即用型工作液，可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。

适用范围： DAPI 染色液可以用于活细胞和固定细胞的染色。

储存:  -20℃避光可长期储存，2-8℃可保存6个月。

操作步骤（仅供参考）

1. 固定细胞或组织切片： 经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI 染色。

2. 贴壁细胞： 加入少量 DAPI 染色液，覆盖住样品即可。吸除 DAPI 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。

3. 悬浮细胞： 至少 加入待染色样品体积3倍的色液，混匀。 室温染色 5-10 分钟。

4. 移植的细胞： 在细胞移植前，将DAPI 以一定的浓度加入培养基中，与细胞共同孵育过夜，用PBS 缓冲液漂洗至少6 次以洗掉未结合的DAPI，再用酶消化后离心收集细胞，加入DMEM 培养基制成细胞悬液以备用。

5. 置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。

说明

1. DAPI 被认为具有致癌性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。

2. 本产品需避光，并尽量避免反复冻融。

3. 荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。

4. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。抗荧光衰减封片剂可向本公司订购

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。