储存：-20°C避光

有效期：半年

描述： BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物。在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的蓝紫色的NBT-formazan 。

适用：

免疫组化实验,包括细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色;

Western，Northern, Southern杂交等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测;

细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。 

组成：

1x碱性磷酸酯酶显色缓冲液 150mL  （2瓶）

BCIP溶液(25X)            5mL

NBT溶液(25X)            5mL

使用说明：

1.        对于组织切片、细胞样品或膜而言，在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3次，每次5-10分钟。对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也用适当洗涤液洗涤3次，每次5-10分钟。

2.        40uL NBT溶液(25X)与1ml 1x碱性磷酸酯酶显色缓冲液混匀，再加入40ul BCIP溶液(25X)混匀，配置成反应工作液，最好现用现配。

3.        把经过洗涤后的NC膜或PVDF膜或其他样本浸入反应工作液，在确保能够充分覆盖样本。

4.        室温平缓摇动孵育，细心观察反应过程，当蛋白条带的颜色深度达到要求（一般约20-30 分钟）时，把膜浸入蒸馏水中停止反应（注意：若信号太弱可增加反应时间）。

注意事项：

1.          BCIP对人体有刺激性，NBT对人体有害，请戴手套操作，注意防护。

2.          可根据样本的量按照比例适当扩大反应工作液体积。

3.          显色须在严密观察下进行；时间可根据显色情况调整，过长则造成显色过度，出现非特异染色，干扰结果判断或出现假阳性结果。

4.          显色过深的常见原因： 封闭不佳；抗体浓度过高；洗涤不充分；显色时间过长。

5.          显色过浅的常见原因：目的蛋白含量过少；抗体种类不合适或抗体浓度过低；显色时间不够；

6.          本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品等用途。

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