凝血酶和肝素辅因子Ⅱ是人体凝血及抗凝血系统中的重要组成部分。肝素辅因子Ⅱ在有肝素或硫酸皮肤素催化时,可迅速凝血酶活性。研究肝素辅因子Ⅱ与凝血酶相互作用的分子机制有助于发现或设计出对血栓性疾病有效的凝血酶拮抗剂,对血栓性疾病的和提供新手段和带来新希望。

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)水平。用纯化的犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ))抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ),再与HRP标记的肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)浓度。

研究人黄素化颗粒细胞中肝素结合(HB-EGF)的表达特点.方法:收集体外受精-胚胎移植过程中的人黄素化颗粒细胞进行体外培养;应用RT-PCR法和免疫细胞化学法分别检测HB-EGF的mRNA和蛋白表达;应用实时RT-PCR法检测HB-EGFmRNA量的变化。结果:人黄素化颗粒细胞中存在HB-EGF的mRNA和蛋白表达。培养基中加入重组HB-EGF后,HB-EGF mRNA的表达量迅速上升,2 h内达高峰,然后回落,于12 h内降至处理前水平.结论:人黄素化颗粒细胞中存在HB-EGF的表达;人黄素化颗粒细胞中的HB-EGF可能是瞬时早期反应基因。